常见细胞因子检测方法及相关检测指标推荐！

细胞因子发挥作用的方式

细胞因子通过多种方式发挥作用，包括自分泌作用、旁分泌作用和内分泌作用。在自分泌作用中，细胞因子作用于自身的受体，调节该细胞的功能；在旁分泌作用中，细胞因子作用于邻近细胞，参与局部免疫反应、炎症反应和组织修复；在内分泌作用中，细胞因子通过血液或体液传播，作用于远距离的靶细胞，调节全身性的免疫反应和生理过程。此外，细胞因子还在免疫系统的激活、细胞增殖与分化、以及凋亡的调节中发挥关键作用，确保身体的免疫功能和组织的正常生长与修复。

目前，检测细胞因子的方法种类繁多，依据检测原理和技术手段的不同，主要可以分为以下几类：单一指标检测技术、多指标检测技术以及单细胞层面的细胞因子检测等。

常见细胞因子检测方法

01  ELISA测定（Enzyme Linked Immunosorbent Assay）

免疫吸附测定（ELISA）是一种通过将可溶性抗原或抗体固定在聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原与抗体的特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。

其特点包括稳定性好、检出率高、分子量大，操作简便、快速、灵敏度高、特异性强，实验设备要求低。ELISA广泛应用于各类检测，且无放射性污染，能够进行定性分析以及半微量、微量、超微量的定量分析，是目前应用最广泛、发展最快的酶免疫学技术之一。

02  多重免疫荧光分析（Multiplex Immunoassay)
   流式微球多因子检测和Luminex多因子检测都是基于荧光标记微球的技术，前者通过不同颜色的荧光标记微球，表面涂覆特定的捕获抗体，利用流式细胞术检测荧光信号，以定量多个细胞因子；后者使用带有不同荧光特征的微球，通过荧光标记的二抗检测样本中的细胞因子，最多可同时检测100种因子。这两种技术的优点是高通量、多因子检测，灵敏度高，适合大规模样本分析。然而，它们也有设备昂贵、数据分析复杂、操作步骤较多的缺点.

03  实时荧光定量PCR（qPCR）

实时荧光定量PCR（qPCR）是一种结合聚合酶链式反应（PCR）与荧光探针的技术，用于定量分析DNA或RNA。在PCR扩增过程中，qPCR实时监测荧光信号的变化，精确测量目标基因的数量。该技术具有高灵敏度、高特异性和高精度，适用于基因表达分析、基因突变检测及病原体定量等多种领域。尽管操作简单，但仍需专业设备和数据分析软件支持，确保结果的准确解读。

04   流式细胞术（Flow Cytometry）

流式细胞术（CBA）是一种基于流式细胞仪的多重蛋白定量检测方法，通过荧光标记微球和捕获抗体在流式细胞仪中检测荧光信号，实现多个细胞因子的定量检测。该技术能够在单细胞水平上分析细胞因子分泌，尤其适用于复杂样本中的多因子同时检测。优点是高通量、高灵敏度、操作简便，缺点是设备昂贵、数据分析复杂。流式细胞术适合大规模样本的免疫分析和细胞因子检测。

不同的细胞因子检测技术各有优势与局限，选择合适的方法需考虑实验需求，如灵敏度、通量和成本等。ELISA适用于单一细胞因子的定量分析，Luminex和流式微球则适合高通量的多因子检测；实时荧光定量PCR（qPCR）用于基因表达定量研究，流式细胞术则能在单细胞分辨率下快速检测多种细胞因子。